正交法优选愈骨葆方的最佳水提取工艺

采用正交试验方法研究愈骨葆方的最佳水提取工艺。通过血清药理学,以提取物对成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性的影响作为考察指标,采用L_9(3~4)正交表设计试验,对加水量(A)、加热时间(B)、浸泡时间(C)及煎煮次数(D)4个因素进行考察,分析最佳提取条件,并验证该工艺的有效性。通过该实验得出愈骨葆方最佳提取工艺:8倍加水量,加热时间60min,浸泡时间30 min,煎煮1次。按此工艺获得的愈骨葆方含药血清能显著地促进成骨相关基因的转录。该实验建立了愈骨葆方的最佳提取工艺,为该复方中药的开发利用提供了试验依据。     

栀子标准汤剂的质量评价方法考察

目的:建立栀子标准汤剂的质量评价方法,为所有源于栀子水提液的制剂的质量标准制定提供参考。方法:制备15批栀子标准汤剂,测定其出膏率、指标成分转移率和pH;建立栀子标准汤剂的UPLC指纹图谱并对主要色谱峰进行质谱鉴定,离子化模式为正、负离子,离子源温度150℃,脱溶剂气体为高纯度氮气,温度550℃,流速800 L·h~(-1),毛细管电压1.0 kV,锥孔电压30 V,扫描范围m/z 50~1 200。结果:栀子标准汤剂的平均出膏率28.4%,栀子苷转移率77.7%,p H均为4。所有样品的指纹图谱相似度均0.99,栀子标准汤剂的主要成分为栀子苷。结论:建立的栀子标准汤剂的质量评价方法稳定可行、重复性好,该评价方法灵敏、准确,为所有源于栀子水煎剂的制剂的质量控制提供参考。     

红花标准汤剂的质量评价

目的:建立红花标准汤剂的质量控制方法。方法:收集有代表性的14批红花,制备红花标准汤剂,计算出膏率、指标成分转移率和溶液pH等参数,评价工艺的稳定性;建立指标成分含量测定和指纹图谱方法,采用UPLC-Q-TOF/MS对主要色谱峰进行结构确认,明确红花标准汤剂中的主要化学成分。结果:标准汤剂出膏率32.6%,羟基红花黄色素A的转移率61.2%,pH 4.1;标准汤剂中羟基红花黄色素A平均质量浓度3.6 g·L~(-1),指纹图谱相似度均0.9,标准汤剂的主要成分为黄酮类。结论:建立了系统评价红花标准汤剂的质量评价方法,为所有源于红花水煎液的制剂的质量标准制定提供参考,所得红花标准汤剂的指标成分转移率高、质量均一性良好。     

眼树莲的化学成分分析

目的:对萝藦科眼树莲Dischidia chinensis全株的化学成分进行分离纯化并对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。方法:眼树莲全株干重5.0 kg,粉碎,用95%乙醇室温浸提3次,过滤,合并滤液后经真空减压浓缩得粗浸膏,将其分散于水中成悬浊液,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。运用小孔树脂(MCI),硅胶柱色谱,LH-20羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)等柱色谱方法对眼树莲乙酸乙酯萃取物经行分离纯化,应用TLC跟踪监测,分离得到纯度较高的单体化合物。依据各个化合物的理化常数和波谱数据分析对各单体化合物的化学结构进行进一步鉴定。结果:从眼树莲中分离鉴定了10个化合物,分别为β-香树素(1),羽扇豆醇(2),β-香树素乙酸酯(3),3-表木栓醇(4),香草醛(5),4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲醛(6),2-羟基-1-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙基-1-酮(7),1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1-methoxypropan-2-ol(8),pavonisol(9),S(+)-dehydrovomifoliol(10)。结论:化合物1~10均为首次从眼树莲中分离得到。     

炒九香虫的炮制工艺优化及其质量标准的建立

目的:优选炒九香虫的炮制工艺,并建立其质量标准。方法:采用滚筒式炒药机,以炮制温度、炮制时间、炒药机转速为炮制因素,以镇痛率、多巴胺二聚体含量和醇溶性浸出物得率为考察指标,在单因素试验基础上,通过正交试验优选九香虫的炒制工艺,利用最佳工艺对10个不同批次的九香虫进行炒制,并测定其总灰分和醇溶性浸出物的含量。结果:炒九香虫的最佳工艺为炒制温度170℃,炒制时间5 min,炒药机转速50 r·min~(-1)。建议炒九香虫的总灰分定为不超过5.2%,醇溶性浸出物不得少于16.8%。结论:优选的炮制工艺合理可靠、稳定性好、方法简便,为规范炒九香虫饮片的炮制工艺和质量标准提供科学依据。     

蓝布正提取物对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马NT-3,BDNF蛋白表达的影响

目的:观察蓝布正提取物(GHE)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力的影响并探讨其作用的机制。方法:采用双侧颈总动脉结扎法制作VD大鼠模型,将大鼠随机分成假手术组,模型组,GHE高、中、低剂量组(7,3.5,1.75 g·kg~(-1))和阳性药组(天保宁银杏叶片,0.007 g·kg~(-1)),各组灌胃相应药物,每日1次,连续35 d,在第30~35天进行Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,Morris水迷宫实验结束后处死大鼠,收集大脑样本,免疫组化法检测海马CA1区B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2,神经营养因子-3(NT-3),脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达。结果:与模型组比较,GHE高、中剂量组可明显缩短大鼠的逃避潜伏期,增加穿越平台数(P0.05);GHE高、中、低剂量组可显著降低海马CA1区Bax表达,升高Bcl-2,NT-3,BDNF表达(P0.05,P0.01)。结论:GHE能改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与促进海马CA1区NT-3,BDNF的表达,抑制神经细胞凋亡有关。     

不同产地桔梗性状、浸出物、桔梗皂苷D含量及HPLC指纹图谱比较

目的:对国家资源普查收集的产自10个省市的58批桔梗样品进行性状鉴别,测定其浸出物、桔梗皂苷D的含量,建立HPLC指纹图谱并对其进行比较。方法:按照2015年版《中国药典》方法测定浸出物及桔梗皂苷D含量;采用高效液相-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),梯度洗脱,建立不同产地桔梗样品HPLC指纹图谱。结果:58批桔梗样品中有2批表面色泽,7批大小,11批断面特征不符合2015年版《中国药典》规定;浸出物、桔梗皂苷D的含量的总不合格率为36.20%;建立了58批桔梗样品的特征指纹图谱,共找到17个共有峰;四川省桔梗样品浸出物、桔梗皂苷D含量及HPLC指纹图谱相似度3个方面均较高,重庆市、湖南省桔梗样品3个方面均较低;对58批不同产地桔梗进行了聚类分析及性状、浸出物、桔梗皂苷D含量和HPLC指纹图谱的比较研究,浸出物、桔梗皂苷D含量及HPLC指纹图谱相似度不成正向相关,但样品中浸出物含量以及各成分含量的差异与样品性状特征(皮部)具相关性。结论:所鉴别的性状特征,测定的浸出物、桔梗皂苷D含量以及建立的HPLC指纹图谱可为优质桔梗的筛选,新版《中国药典》标准的修订以及桔梗质量评价,提供更全面、真实、具代表性的参考依据。     

瓦楞子的炮制工艺优选

目的:优选瓦楞子的炮制工艺,为控制瓦楞子炮制品的质量奠定基础。方法:以性状、饮片得率、水溶性浸出物含量、水煎液Ca2+含量和水浸液p H的综合评分为指标,通过单因素试验和正交试验优选瓦楞子煅制工艺和煅醋淬工艺,并与其煅制后盐水淬工艺、水淬工艺进行比较。结果:瓦楞子最佳煅制工艺条件为温度750℃,煅制时间30 min;最佳煅醋淬工艺条件为温度850℃,煅制90 min后立即投入0.3倍量醋浓度为9%的米醋中进行醋淬,至醋吸净为度;不同炮制工艺多指标综合评分的排序为煅醋淬品煅制品煅盐水淬品煅水淬品;最优工艺条件下煅醋淬品的性状符合"灰白色,质地酥脆"的要求,其饮片得率67.40%,p H 12.47,水溶性浸出物质量分数9.70%,水煎液Ca2+质量分数7.01%。结论:优选的炮制工艺稳定可行,可指导今后工业化生产,提高瓦楞子炮制品的质量,确保临床用药的安全性和有效性。     

The effect of German chamomile (Marticaria recutita L.) extract and tea tree (Melaleuca alternifolia L.) oil used as irrigants on removal of smear layer: a scanning electron microscopy study

AIM: To compare the cleaning effectiveness of chamomile hydroalcoholic extract and tea tree oil to 2.5% sodium hypochlorite (NaOCl) solution as an intracanal irrigant for the removal of the smear layer. METHODOLOGY: Forty extracted, single-rooted, mature, permanent, human teeth were allocated at random into one of three experimental groups of ten teeth and two control groups of five teeth. For each tooth, the pulp chamber was accessed and the canal prepared using K-type files and Gates-Glidden burs, using a step-back technique; the apical stop was prepared to a size 30. Each canal was subsequently irrigated with one of the following solutions: distilled water (as a negative control), 2.5% NaOCl + 17% ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) (as a positive control), chamomile or tea tree oil or 2.5% NaOCl. Each tooth was split longitudinally and prepared for examination by scanning electron microscopy (SEM). The quantity of smear layer remaining on the three levels of each canal (coronal, middle and apical) was examined using magnifications of 2000 and 5000x. The data were analysed using nonparametric Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U-tests. RESULTS: The most effective removal of smear layer occurred with the use of NaOCl with a final rinse of 17% EDTA (negative control) followed by the use of a chamomile extract. Chamomile extract was found to be significantly more effective than distilled water and tea tree oil (P < 0.008).The use of a 2.5% NaOCl solution alone, without EDTA and that of tea tree oil, was found to have only minor effects. There was no statistical difference between distilled water, 2.5% NaOCl and tea tree oil. CONCLUSIONS: The efficacy of chamomile to remove smear layer was superior to NaOCl alone but less than NaOCl combined with EDTA.     

五倍子水提取物抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6

目的：研究不同浓度五倍子水提取物对内毒素(LPS)介导的人牙龈成纤维细胞(HGF)分泌IL-6水平的影响。方法：采用MTT比色法和放射免疫分析法(RIA)，测定五倍子水提取物对HGF增殖的影响；及对以25μg／mL内毒素作为刺激因子，HGF培养上清中IL-6水平的影响。结果：五倍子水提取物可显著抑制内毒素诱导HGF分泌IL-6水平，其作用在一定范围内呈浓度依赖性，同时当其浓度＞50μg／mL时，可抑制HGF增殖。结论：五倍子水提取物能够抑制内毒素诱导人牙龈成纤维细胞分泌IL-6的水平，浓度过高时对HGF增殖有影响，提示一定浓度(＜50μg／mL)的五倍子水提取物具有抗炎作用，有助于对牙周病的防治。